ಡಚ್ ಸಂಶೋಧಕರು CRISPR ಮತ್ತು ಬಯೋಲುಮಿನೆಸೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಸಂಯೋಜಿಸುತ್ತಾರೆಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ರೋಗಗಳು

ನೆದರ್ಲ್ಯಾಂಡ್ಸ್ನ ಸಂಶೋಧಕರ ಪ್ರಕಾರ, ಹೊಸದಾಗಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾದ ರಾತ್ರಿಯ ಪ್ರೋಟೀನ್ ವೈರಸ್ ರೋಗಗಳ ರೋಗನಿರ್ಣಯವನ್ನು ವೇಗಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸರಳಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ACS ಪಬ್ಲಿಕೇಶನ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಬುಧವಾರ ಪ್ರಕಟವಾದ ಅವರ ಅಧ್ಯಯನವು ವೈರಲ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ಹೊಳೆಯುವ ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ ನೀಲಿ ಅಥವಾ ಹಸಿರು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಅವುಗಳ ನೋಟವನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾದ, ಒಂದು-ಹಂತದ ವಿಧಾನವನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.
ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಫಿಂಗರ್‌ಪ್ರಿಂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವ ಮೂಲಕ ರೋಗಕಾರಕಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುವುದು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಡಯಾಗ್ನೋಸ್ಟಿಕ್ಸ್, ಬಯೋಮೆಡಿಕಲ್ ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಆಹಾರ ಮತ್ತು ಪರಿಸರ ಸುರಕ್ಷತೆಯ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ.ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ (PCR) ಪರೀಕ್ಷೆಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗಿರುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಅತ್ಯಾಧುನಿಕ ಮಾದರಿ ತಯಾರಿಕೆ ಅಥವಾ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ, ಕೆಲವು ಆರೋಗ್ಯ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್‌ಗಳು ಅಥವಾ ಸಂಪನ್ಮೂಲ-ಸೀಮಿತ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್‌ಗಳಿಗೆ ಅವುಗಳನ್ನು ಅಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿಸುತ್ತದೆ.
ನೆದರ್‌ಲ್ಯಾಂಡ್‌ನ ಈ ಗುಂಪು ವಿವಿಧ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದಾದ ವೇಗವಾದ, ಪೋರ್ಟಬಲ್ ಮತ್ತು ಬಳಸಲು ಸುಲಭವಾದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಡಯಾಗ್ನೋಸ್ಟಿಕ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲು ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯಗಳು ಮತ್ತು ಆಸ್ಪತ್ರೆಗಳ ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳ ನಡುವಿನ ಸಹಯೋಗದ ಫಲಿತಾಂಶವಾಗಿದೆ.
ಅವರು ಫೈರ್ ಫ್ಲೈ ಫ್ಲಾಷ್‌ಗಳು, ಫೈರ್‌ಫ್ಲೈ ಗ್ಲೋಗಳು ಮತ್ತು ಜಲವಾಸಿ ಫೈಟೊಪ್ಲಾಂಕ್ಟನ್‌ನ ಸಣ್ಣ ನಕ್ಷತ್ರಗಳಿಂದ ಸ್ಫೂರ್ತಿ ಪಡೆದಿದ್ದಾರೆ, ಇವೆಲ್ಲವೂ ಬಯೋಲುಮಿನೆಸೆನ್ಸ್ ಎಂಬ ವಿದ್ಯಮಾನದಿಂದ ನಡೆಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ.ಈ ಗ್ಲೋ-ಇನ್-ದಿ-ಡಾರ್ಕ್ ಪರಿಣಾಮವು ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ರಾಸಾಯನಿಕ ಕ್ರಿಯೆಯಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ.ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳು ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್ ಪ್ರೊಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಸಂವೇದಕಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಯೋಜಿಸಿದರು, ಅದು ಗುರಿಯನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಾಗ ವೀಕ್ಷಣೆಗೆ ಅನುಕೂಲವಾಗುವಂತೆ ಬೆಳಕನ್ನು ಹೊರಸೂಸುತ್ತದೆ.ಇದು ಪಾಯಿಂಟ್-ಆಫ್-ಕೇರ್ ಪತ್ತೆಗೆ ಈ ಸಂವೇದಕಗಳನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿಸುತ್ತದೆ, ಪ್ರಸ್ತುತ ಅವುಗಳು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಡಯಾಗ್ನೋಸ್ಟಿಕ್ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿಗೆ ಅಗತ್ಯವಾದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ.CRISPR ಜೀನ್ ಎಡಿಟಿಂಗ್ ವಿಧಾನವು ಈ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಒದಗಿಸಬಹುದಾದರೂ, ಸಂಕೀರ್ಣವಾದ, ಗದ್ದಲದ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ದುರ್ಬಲ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಇದು ಹಲವು ಹಂತಗಳು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ವಿಶೇಷ ಸಾಧನಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ.
ಸಂಶೋಧಕರು CRISPR-ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರೊಟೀನ್ ಅನ್ನು ಬಯೋಲ್ಯುಮಿನೆಸೆಂಟ್ ಸಿಗ್ನಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲು ಒಂದು ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದಾರೆ, ಇದನ್ನು ಸರಳ ಡಿಜಿಟಲ್ ಕ್ಯಾಮೆರಾದಿಂದ ಕಂಡುಹಿಡಿಯಬಹುದು.ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಸಾಕಷ್ಟು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್‌ಎ ಮಾದರಿ ಇದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು, ಸಂಶೋಧಕರು ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ (ಆರ್‌ಪಿಎ) ಅನ್ನು ನಡೆಸಿದರು, ಇದು ಸುಮಾರು 100 ° ಎಫ್‌ನ ಸ್ಥಿರ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಸರಳ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ.ಅವರು ಲ್ಯುಮಿನೆಸೆಂಟ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಸೆನ್ಸರ್ (LUNAS) ಎಂಬ ಹೊಸ ವೇದಿಕೆಯನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದರು, ಇದರಲ್ಲಿ ಎರಡು CRISPR/Cas9 ಪ್ರೊಟೀನ್‌ಗಳು ವೈರಲ್ ಜೀನೋಮ್‌ನ ವಿವಿಧ ಪಕ್ಕದ ಭಾಗಗಳಿಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿರುತ್ತವೆ, ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ ಅವುಗಳ ಮೇಲೆ ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್ ತುಣುಕನ್ನು ಲಗತ್ತಿಸಲಾಗಿದೆ.
ತನಿಖಾಧಿಕಾರಿಗಳು ಪರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತಿರುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವೈರಲ್ ಜೀನೋಮ್ ಇದ್ದಾಗ, ಎರಡು CRISPR/Cas9 ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು ಗುರಿಯ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ;ರಾಸಾಯನಿಕ ತಲಾಧಾರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಅಖಂಡ ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ರೂಪಿಸಲು ಮತ್ತು ನೀಲಿ ಬೆಳಕನ್ನು ಹೊರಸೂಸುವಂತೆ ಮಾಡಲು ಅವು ಹತ್ತಿರದಲ್ಲಿವೆ..ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಸೇವಿಸಿದ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಲು, ಸಂಶೋಧಕರು ಹಸಿರು ಬೆಳಕನ್ನು ಹೊರಸೂಸುವ ನಿಯಂತ್ರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬಳಸಿದರು.ಹಸಿರು ಬಣ್ಣದಿಂದ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ಬದಲಾಗುವ ಟ್ಯೂಬ್ ಧನಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಸಂಶೋಧಕರು RPA-LUNAS ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವ ಮೂಲಕ ತಮ್ಮ ವೇದಿಕೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದರು, ಅದು ಪತ್ತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆSARS-CoV-2 RNAಬೇಸರದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಇಲ್ಲದೆ, ಮತ್ತು ನಾಸೊಫಾರ್ಂಜಿಯಲ್ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಅದರ ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿದರುCOVID-19ರೋಗಿಗಳು.RPA-LUNAS SARS-CoV-2 ಅನ್ನು 20 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ 200 ಪ್ರತಿಗಳು/μL ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ವೈರಲ್ ಲೋಡ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಿದೆ.
ಸಂಶೋಧಕರು ತಮ್ಮ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಅನೇಕ ಇತರ ವೈರಸ್‌ಗಳನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಪತ್ತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಂಬುತ್ತಾರೆ."RPA-LUNAS ಪಾಯಿಂಟ್-ಆಫ್-ಕೇರ್ ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ರೋಗ ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಆಕರ್ಷಕವಾಗಿದೆ" ಎಂದು ಅವರು ಬರೆದಿದ್ದಾರೆ.